[摘要]目的：建立瑶药搜山虎的生药鉴定方法。方法：考查本草文献记载和附图，野外调查搜山虎药材的原植物来源，通过实地调研及咨询瑶医使用搜山虎药材植物来源情况，通过产地瑶医及草医收集搜山虎药材原植物标本，核对药材原植物标本和咨询分类专家，并对搜山虎的原植物形态、药材性状、组织和粉末显微特征及薄层色谱等进行生药学研究。结果：产地及野外调查表明瑶医和草医使用的搜山虎药材植物基原是芸香科岭南花椒的根和茎。其根表面具细纵纹，可见近圆形或椭圆形的皮孔样横向突起;茎表面有皮孔和鼓丁状皮刺。根横切面有木栓细胞数列，皮层中有草酸钙方晶和油细胞散在;韧皮部外侧有中柱鞘纤维数个相聚并断续排列成环;木质部木射线1～4列细胞，导管单个或2～5个相连。茎横切面韧皮部外侧中柱鞘纤维稀疏并断续排列成环，木部宽广，有髓。根、茎粉末鉴定显示韧皮纤维多单个，呈长梭形，孔沟明显;纤维成束，周围薄壁细胞含草酸钙方晶形成晶纤维;草酸钙方晶大量散在，成行或成片存在于薄壁细胞中;具缘纹孔导管多见。薄层色谱鉴定结果显示二甲苯-乙酸乙酯(15∶1)为最佳的展开系统。结论：应用建立的基原、性状、显微、薄层色谱等中药鉴定方法能够有效鉴定搜山虎药材，为搜山虎新药材质量标准的制定及搜山虎药材的开发利用提供了理论依据。
[关键词]搜山虎;瑶药;岭南花椒;资源调查;考证;显微特征;薄层色谱
搜山虎是一种民间常用药，也是瑶医及草医常用的一味药材，具有祛风解毒、散瘀消肿、行气镇痛的功效;主治毒蛇咬伤、风湿痹痛、胃痛、牙痛、扭挫伤、骨折、感冒等[1]。搜山虎是双虎肿痛宁(酊剂)的主要原料，收载于《广西中药材标准》[2]、卫生部《中药成方制剂》[3]，地方、国家中药材质量标准正文尚未见收载，属于“倒挂品种”。搜山虎在《广西本草选编》[1]、《中华本草》[4]、《全国中草药汇编》[5]等本草论著中均有记载。搜山虎药材商业流动性低，药材年产销量约50～100吨。为了更好地开发利用搜山虎药用资源，正本清源，笔者对搜山虎药材植物基原进行了调查和生药学研究，以期为搜山虎新药材质量标准的制定、药厂收购及开发利用搜山虎药材提供理论依据。
1搜山虎药材资源调查及样品鉴定情况
为了更好地掌握搜山虎药材资源情况，本研究团队结合前几年的中草药资源调查情况，对搜山虎药材主产区开展了专项资源调查，结合柳州、桂林、南宁等周末草药药市以及三江、靖西、恭城、湖南江华等端午节药市调研，通过咨询瑶族医生和民间草医，收集搜山虎药材样品，通过初步鉴定后，装订标本，在广西植物研究所标本馆进行标本核对，由广西壮族自治区植物研究所李光照研究员对标本进行最终鉴定，瑶医和民间草医使用的搜山虎药材植物基原为芸香科植物岭南花椒(ZanthoxylumaustrosinenseHuang)，药材样品部位为根和茎，原植物及药材见图1、图2。搜山虎药材主要产区在广西和湖南，是瑶医常用药材，在安徽南部，浙江金华和开化，江西、福建、湖北西南部和广东北部等省市有分布。各产区搜山虎药材标本及药材原植物标本保存于桂林三金药业股份有限公司中药研究所标本室。搜山虎药材样品鉴定结果见表1。
2材料与方法
2.1原植物与样品来源搜山虎原植物采自广西临桂六塘镇(标本号：190803)、鹿寨县平山镇(标本号：190423)，对口药材样品2份，均由广西壮族自治区植物研究所李光照研究员鉴定。
2.2主要仪器与试剂DM750显微镜(德国Leica公司);TANKPE060纯水-超纯水一体机(Millipore公司);CAMAGREPROSTAR3薄层色谱成像仪(瑞士卡玛公司);GF-200分析天平(日本AND公司);BUG40-06超声波清洗器(上海必能信公司);薄层层析硅胶G薄层板(青岛海洋化工有限公司，批号：20170808)。搜山虎对照药材(中国食品药品检定研究院，批号：121385-201201);间苯三酚、水合氯醛、丙三醇、盐酸、甲醇、乙醇、二甲苯、乙酸乙酯等均为分析纯;水为纯化水(自制)。
2.3鉴定方法①性状鉴定。从形状、颜色、表面特征、质地、断面、气、味等方面，观察搜山虎的性状特征。②显微鉴定。取搜山虎的根和茎，参照2020年版《中国药典》四部通则2001显微鉴别法下横切片制片、粉末制片的方法制片观察。③薄层色谱鉴定。取本品粉末1g，加乙醇20mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液。另取搜山虎对照药材1g，同法制成对照药材溶液。参照2020年版《中国药典》四部通则0502薄层色谱法实验，吸取上述2种溶液各10～15μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，将点样后的薄层板分别用正己烷-乙酸乙酯-乙酸(9∶3∶0.1)、甲苯-无水乙醇(19.5∶0.5)、二甲苯-乙酸乙酯(15∶1)3个不同的展开系统展开，展距8cm，取出，晾干，置紫外光灯于365nm下检视，对比展开效果，筛选分离效果好，斑点清晰的展开系统。
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3鉴定结果
3.1药材性状见图2。搜山虎药材根呈圆柱形，略弯，有少数分枝。表面深黄棕色至深棕色，具细纵纹，可见近圆形或椭圆形的皮孔样横向突起。茎呈圆柱形，表面灰褐色至棕褐色，有皮孔和鼓丁状皮刺，横断面中央可见髓部。质坚硬。气微，味苦。
3.2根、茎横切面显微特征搜山虎根横切面见图3、图4。木栓细胞数列，皮层中有草酸钙方晶和油细胞散在，有少数草酸钙簇晶;韧皮部较窄，外侧有中柱鞘纤维数个相聚并断续排列成环;形成层不明显;木质部木射线1～4列细胞，导管单个或2～5个相连，多数切向排列。搜山虎茎横切面见图5、图6。木栓层为数列扁平细胞，易脱落;中柱鞘纤维稀疏并断续排列成环，木部宽广，有髓。
3.3根、茎粉末显微特征见图7、图8。搜山虎根、茎粉末均呈淡棕黄色。韧皮纤维多单个，呈长梭形，孔沟明显;纤维成束，周围薄壁细胞含草酸钙方晶形成晶纤维;草酸钙方晶大量散在，成行或成片存在于薄壁细胞中;具缘纹孔导管多见。
3.4薄层色谱鉴别结果见图9～11。以正己烷-乙酸乙酯-乙酸系统展开时，两个主斑点处都有其他颜色斑点干扰，说明特征组分未能与其余组分完全分离。以甲苯-无水乙醇系统展开时，斑点较分散，并且使用甲苯作为展开剂毒性较大。以二甲苯-乙酸乙酯系统展开时，分离效果良好，特征斑点集中，在不同批次供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，均有2个相同颜色的荧光主斑点，因此选择二甲苯-乙酸乙酯(15∶1)为展开系统。
4讨论
通过调查发现，搜山虎药材植物基原为岭南花椒(ZanthoxylumaustrosineuseHuang)，是瑶医的常用药材，结合瑶医和草医的用药经验，药用部位为根和茎，药材主要产区为广西和湖南。本研究建立的搜山虎药材性状、显微及薄层色谱鉴别方法，专属性好，方法简便，可以作为搜山虎药材的鉴别方法，为搜山虎药材的质量标准制订奠定了基础。其中薄层色谱条件以二甲苯-乙酸乙酯(15∶1)的分离效果最好，斑点圆整清晰，比移值适中，重现性好。——论文作者：钟小清，卢志标，唐倩，吕高荣，刘曲山
