【摘要】 目的：通过对白芍在复方中醇提取工艺的研究，确定最佳提取条件。方法：采用正交实验方法，以芍药苷、出膏率为考察指标，优选最佳提取条件。结果：影响提取的主次因素为提取次数>醇浓度>提取时间>溶媒用量。结论：此复方提取宜采用40%乙醇，6倍量，提取二次，每次1.5小时。
本文选自：《滨州医学院学报》是经国家科委批准，山东省教育厅主管，滨州医学院主办面向国内外公开发行的综合性医学学术期刊，主要刊登基础医学、临床医学、预防医学、口腔医学、药学及相关领域的新理论、新成果、新技术、新方法、新经验。收录情况：先后加入《中国期刊网》、《中国学术期刊(光盘版)》、中国学术期刊综合评价数据库、中国科学技术信息研究所万方数据库、中文生物医学期刊文献数据库、中文科技期刊数据库等。
【关键词】白芍,芍药苷,正交试验,高效液相色谱
清空胶囊为用于治疗偏头痛的中药复方药物，是沈阳市科技攻关计划项目。根据方中药物的性质及药效学考察，我们将其分成几个工艺路线。本试验是其中的醇提取工艺研究部分，目的是采用正交试验方法，确定醇提取最佳条件。
1 仪器与材料
1.1 仪器
LC-10P液相泵，LC-10UV检测器、烘箱、HS3120超声波清洗器，数显水浴锅等。
1.2 材料
1.2.1 药材
醇提取部分四味药材，购于毫州春蕾药材公司，经鉴定：①白芍：为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，符合中国药典2005版一部白芍项下规定;②川芎：为伞形科植物川芎Ligusticum chuanqiong Hort.的干燥根茎，符合中国药典2005版一部川芎项下规定;③苦参：为豆科植物苦参Sophora flavescons Ait.的干燥根，符合中国药典2005版一部苦参项下规定;④甘草：为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根及根茎，符合中国药典2005版一部甘草项下规定。
1.2.2 试剂、试药
甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯，水为重蒸馏水;芍药苷对照品购于中国药品生物制品检定所。
2 实验方法与结果
2.1 正交试验设计
采用正交实验法，以乙醇浓度、提取次数、提取时间、加醇量为考察因素，每个因素选择三个水平，以出膏率、芍药苷含量为指标按L9(34)表进行实验，通过实验结果的方差分析确定最佳醇提取工艺条件。
2.2 芍药苷的测定
照《中国药典》2005版一部附录高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水-冰醋酸(25︰75︰0.5)为流动相;检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备：精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.095mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备：白芍10g、川芎10g、苦参10g、甘草6g，按L9(34)正交试验表，进行9组试验，提取液滤于1000ml量瓶中，用相应的提取溶媒稀释至刻度，摇匀，静置。精密量取上清液2ml，于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.3 出膏率的测定
精密量取正交试验提取液200ml，分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃干燥3小时后，移置干燥器中，冷却30min，迅速精密称定重量，计算出膏率(%)。
3 结论与讨论
从方差分析可以看出，影响提取的主次因素为：提取次数>醇浓度>提取时间>溶媒用量。由于我们选取芍药苷含量为主要指标，故芍药苷含量方差分析结果为主要参考结果。提取次数为芍药苷含量及出膏率的影响均非常大，2次提取芍药苷含量最高，3次提取出膏率较大，说明第三次提取提出杂质部分较多，故选取2次提取;醇浓度对芍药苷的提取效果影响较大，而对出膏率影响较小，故选取40%乙醇提取;提取时间对芍药苷含量及出膏率影响较显著，均以提取1.5h 为佳;乙醇加入量对芍药苷含量几乎没有影响，而仅影响出膏率，从节省资源上考虑，选取6倍量提取。最终的较优方案为A2B1C2D2，即40%乙醇，提取二次，每次6倍量溶媒，提取1.5小时。
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