随着医疗技术水平的不断进步,临床检验中引入了越来越多的高新技术,质谱技术就是其中之一,其主要是一种对蛋白质进行分析的较为强大的工具,其存在高通量、快速准确、自动化、操作简便等优点,所以在临床的微生物检验中应用较为广泛,在鉴定病原体方面具有显著效果。这一技术从出现到发展对传统检验模式进行了挑战,令检验的实效性和灵敏度得以提升。因此,为帮助病人们进行了解,下面就来介绍一下质谱技术在临床微生物检测中的主要应用。
一、质谱技术的原理和优点
质谱技术的主要工作原理是把基质和样品进行混合,而后将其点在相应的金属靶盘上,构成一个共结晶,而后将激光当做能量的来源对结晶体进行辐射,此时基质分子会对能量进行吸收,令样品开始吸附,而后发生电离反应,形成质荷比不同的带电离子。而样品离子处于加速的电场下,可以产生相同的动能,而后经过高压的加速和聚焦,进入到飞行时间的质谱分析器中,完成质量分析的操作。其中,飞行时间的平方和离子质荷比呈现正相关的关系,通过计算机的处理,可以形成质量图谱,经过相关的软件进行分析和比较,可以筛选以及确定特异性的图谱,进而鉴定或者区分菌株以及微生物。
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现今的临床微生物实验中,在鉴定细菌方面大都依靠传统生化反应以及形态学技术等,在鉴定细菌方面也需首先进分离纯化,就算利用相关的自动化鉴定仪,也需保证时效性的要求,特别是在检测菌血症这类重症感染的过程中。而质谱技术一般不要求样品纯度,所以样品检测过程中可以不进分离和纯化,可以进行直接的点样。该方式的操作较为简便,还可不断扩展数据库,所以可准确且快速地完成检测,还可保证高通量。
二、质谱技术在临床微生物检测中的应用
就现今的情况来看,质谱技术现已被广泛应用于临床微生物检测中,主要检测的菌种包括霉菌、酵母菌、分枝杆菌、厌氧菌、需氧菌、革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌等。
1、鉴定及分析细菌
质谱技术可对多种细菌进行充分分析,其中,检测的样本既可为进分离培养的一些纯菌落,同样也可为原始的临床样本,其可以被直接用来检测。质谱技术在鉴定临床常见菌方面存在较高的准确性,所以其在临床的微生物检验中备受青睐。
其一是在鉴定革兰氏阴性菌方面具有显著效果。鉴定革兰氏阴性菌,比如常见的肠杆菌科细菌以及非发酵菌,存在较高的准确率。经过研究实验表明,利用质谱技术鉴定革兰氏阴性菌具有较为明显的效果,经过对比后也可以发现,质谱技术还能将革兰氏阴性菌快速鉴定出来。
其二是在鉴定革兰氏阳性菌方面,也有一定的效果。经过研究调查发现,利用质谱技术鉴定和分析两千多株细菌,其中有536株革兰氏阳性菌、链球菌28株、葡萄球菌357株、肠球菌81株、还有其他的革兰氏阳性菌29株,经过鉴定发现,质谱技术对肠球菌和葡萄球菌的鉴定成功率达到了100%,而在鉴定链球菌方面还存在一定的弊端,鉴定到种的只有63株,准确的概率约为92.6%,但对缓症链球菌及肺炎链球菌的鉴定则存在更大的缺陷。
其三是鉴定和分析厌氧菌。因在分析厌氧菌的过程中,对鉴定的要求以及培养的要求相对较高,所以伴随临床重视厌氧菌感染的程度越来越高,培养厌氧菌的要求也开始随之升高。利用传统的生化鉴定技术,耗费的时间较长,而且很容易受到外界因素的不良影响,因此无法保证准确的鉴定结果,进而无法满足鉴定分许所需的实效性要求。而经过研究调查发现,利用质谱技术鉴定厌氧菌,鉴定结果的准确率可达到94.82%,其与其他的鉴定技术相比,也存在较为明显的优势,对临床感染性疾病的诊断和治疗具有较为有利的推动作用。
其四是鉴定和分析结合分枝杆菌。同样经过研究调查发现,在鉴定分枝杆菌方面,质谱技术的诊断正确率较高,可达91%左右,所以可被临床推广应用。
2、鉴定和分析真菌
近年来,临床上出现了许多侵袭性的真菌感染病症,特别是现今正处于人口老龄化日益加剧的时期,临床上过多的使用侵入性的治疗,导致很多病人出现免疫缺陷,进而引发较高的疾病发病率及死亡率。传统的鉴定培养真菌的手段相对来说耗费的时间过长,同时还需专业知识较高且工作经验较为丰富的工作人员进行操作,特别是在鉴定一些常见的菌株时,常常需要耗费诸多人力物力,所以临床上需要快速鉴定真菌的方式来缓解医疗难题。经过调查发现,利用质谱技术进行真菌的分析及鉴定,具有较高的准确率,且存在较为明显的速度优势。
而在鉴定丝状真菌方面,质谱技术的准确程度同样可观,这对于临床上微生物检测也是一项重要突破,对于一些因常见的丝状真菌所引发的疾病来说,该技术也发挥了重要的诊断预防作用,对病人和医疗界而言,都具有推动作用。
综上所述,我国的科学技术水平在不断发展进步,质谱技术作为现今临床微生物检测中常见的检测方式之一,其具有较为显著的优越性,并以这种优越性检测出了多种临床微生物,对病人疾病的治疗起到了关键性的作用,同时也推动了医疗水平的进一步上升。本文据此介绍了质谱技术在临床上的应用,以便病人及其家属存在相关认知。——论文作者:何林林
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