摘 要：为了解原料血浆中抗体水平，为狂犬病、破伤风抗体效价测定提供依据，同时为提高血浆站的抗体效价提供依据，进而提高狂免、破免产品的生产质量，本文对2015—2017年血浆站的狂犬病、破伤风抗体效价检测结果进行三年数据对比，采用ELISA法检测人血浆中狂犬病、破伤风的抗体效价，用柱状图分析各血浆站抗体效价9IU/mL以上、6～9IU/mL血浆所占百分比。结果表明，破免血浆检测量逐年增多，2017年比2015年增长了103%，其中高效价血浆量也在逐年上升。狂免血浆检测量2016年和2017年均比2015年下降了32%，其中高效价的血浆量逐年降低。
关键词：狂犬病;破伤风;抗体效价;ELISA法
破伤风是由破伤风杆菌侵入人体伤口造成的一种特异性感染，是致死性传染病，其高毒力的痉挛毒素可阻断中枢神经系统的抑制性神经递质，引起肌肉强直和典型的全身痉挛[1]。破伤风抗毒素(TAT)是由马血清制成的，部分人会出现过敏反应，而破伤风人免疫球蛋白(TIG)是人血制品，基本没有过敏反应。破伤风人免疫球蛋白主要用于预防和治疗破伤风，尤其适用于对破伤风抗毒素(TAT)有过敏反应者。
狂犬病毒转移的发生起源于被感染宿主的伤口，引起咬伤伤口处唾液病毒的沉积。一旦感染发展，而没有有效的治疗，具有接近100%的致死率。但是，在被咬伤暴露伤口之前或在伤口暴露后很短时间内给予疫苗的注射，能有效避免这种结果的发生[2]。狂犬病人免疫球蛋白主要用于被狂犬或其他疯动物咬伤、抓伤患者的被动免疫。
疫苗和免疫球蛋白是相辅相成的作用，疫苗属于抗原，通过刺激机体产生抗体后起到有效的防护作用，需要较长时间产生抗体，但效力持久;免疫球蛋白属于抗体，能快速起效但效力较短。近年来，临床对血液制品的需求持续攀升，国内血液制品行业无论是原料血浆采集量，还是血液制品产量、品种都在逐年增长[3]。2017年狂免、破免产品签发情况见表1。
了解各浆站原料血浆的狂犬病/破伤风抗体效价水平，是制备用于预防和治疗狂犬病/破伤风的人免疫球蛋白产品的前提[4]。为了解疫苗接种者血清中狂犬/破伤风抗体水平，以评价血浆站的预防接种效果，现对各浆站2015—2017年狂犬疫苗/破伤风疫苗接种者进行血清抗体测定，为浆站提高抗体效价提供依据。
1材料与方法
1.1血浆样品
由武穴武源单采血浆站、郧阳单采血浆站、武生松滋单采血浆站、武生云梦单采血浆站、湖南君山单采血浆站提供。
1.2试剂、仪器设备
人狂犬病病毒IgG抗体测定试剂盒(宁波天润生物药业有限公司、泰安京泰生物技术有限公司生产)、破伤风IgG抗体测定试剂盒(宁波天润生物药业有限公司、泰安京泰生物技术有限公司生产)，试剂盒均为合格品并在有效期内使用。OpsysMR酶标仪(DYNEXTechnologies,Inc.)，PW-960型洗板机(深圳市汇松科技发展有限公司)，CU-600型电热恒温水槽(武汉恒丰中欣生物科技发展有限公司)。
1.3检测方法
采用ELISA法，按照试剂盒说明书操作，阴性对照OD值≤0.1时，试验成立。空白对照位置：A1;阴性对照位置：A6;9IU/mL阳性对照位置：A2、A3;6IU/mL阳性对照位置：A4、A5。9IU/mL阳性对照稀释：稀释液10µL+阳性对照90µL;6IU/mL阳性对照稀释：稀释液40µL+阳性对照60µL;样品稀释：稀释液100µL+样品5µL。酶标板读板结果判定：OD值≥(A2+A3)/2，抗体效价≥9IU/mL;(A4+A5)/2≤OD值<(A2+A3)/2，6IU/mL≤抗体效价<9IU/mL;OD值<(A4+A5)/2，抗体效价<6IU/mL。
1.4分析方法
根据检测数据，采用柱状图对各浆站破伤风、狂犬病人免疫血浆抗体效价进行分析，主要对9IU/mL以上、6～9IU/mL的高效价血浆所占百分比进行三年的对比。
2结果与分析
2.1特异性免疫血浆效价检测总数分析
2015—2017年特免血浆检测数据见表2。从表2中可以看出，破免血浆检测总量呈逐年上涨的趋势，高效价血浆所占百分比也在逐渐增高，破伤风免疫情况逐渐提高。狂免血浆2016年和2017年检测总数均比2015年下降了32%，高效价血浆所占百分比也在逐渐降低，这是由于接种疫苗时间长了免疫效果下降导致的，需要进行狂犬疫苗的加强免疫。
2.2狂犬病特免血浆抗体效价检测结果分析
对比武穴、郧阳、松滋、云梦浆站三年狂免血浆检测的数据，结果见表3。
武穴和郧阳的狂犬血浆检测总数多于松滋和云梦，对几个浆站狂犬抗体效价9IU/mL以上、6～9IU/mL的高效价血浆所占百分比进行三年的对比，结果见图1、图2，从图中可以看出，武穴和郧阳高效价血浆所占百分比多于松滋和云梦，说明武穴和郧阳狂犬免疫效果较好。
2.3破伤风特免血浆抗体效价检测结果
对比君山、松滋、云梦浆站破免血浆三年检测总数，结果见表4。
君山的破伤风血浆检测总数多于松滋和云梦，对几个浆站破伤风抗体效价9IU/mL以上、6～9IU/mL的高效价血浆所占百分比进行三年的对比，结果见图3、图4，从图中可以看出，君山高效价血浆所占百分比多于松滋和云梦，说明君山的破伤风免疫效果较好。
3讨论
从以上数据和柱状图可以看出：破免收浆量逐年增多，2017年比2015年增长了103%，原因是目前破免价格放开，刺激生产厂家增加投产，破免制品价格提高，预计各企业会增加产量。虽然狂免收浆量降低，但是随着经济的增长和狂犬病预防门诊规范处置程度的提高，狂免产品的需求应该会进一步增长。武穴和郧阳浆站高效价狂免血浆较多，君山浆站高效价破免血浆较多，武穴、郧阳、君山三个浆站的采浆量较高，高效价血浆所占百分比也较多。
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狂犬病、破伤风疫苗常规免疫后进行抗体检测十分重要，特别是对暂未产生抗体者，应及时加强免疫，确保免疫效果[5]。为了采集更多的高效价原料血浆制备出安全有效的狂犬病、破伤风人免疫球蛋白制品，使之取之于民、用之于民，建议浆站增大宣传工作，动员更多的献浆员，同时主动严格执行免疫程序，提高回采率，争取多收获高效价血浆。
