摘要:采用纸片扩散法测定120株大肠杆菌分离株对多种药物的耐药性,结果表明,大肠杆菌多重耐药性情况严重,多重耐药达到100%,耐17种药物的菌株数最多,达到20.78%,有些菌株耐药达到20种,对阿米卡星的敏感性最强。
关键词:大肠杆菌;耐药性;敏感性
大肠杆菌病是兽医临床上的常见疾病,能引起多种动物发病。近年来,随着养殖业的发展,抗生素在疾病的防治过程中起着至关重要的作用,但由于抗生素频繁使用及大量滥用,耐药菌株不断增多,特别是多重耐药菌株的出现,对大肠杆菌病的防治带来极大困难,通过开展耐药性试验分析,可以为养殖业户提高可靠的临床用药指导。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1菌种
经分离鉴定得到的120株大肠杆菌。
1.1.2培养基
普通营养琼脂、营养肉汤。
1.1.3主要仪器
医用净化工作台、电热恒温培养箱、空气浴振荡器、可调式微量移液器等。
1.1.4药敏纸片
红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、四环素、多西环素、阿米卡星、大观霉素、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢呋辛等均购自杭州天和微生物试剂有限公司。
1.2方法
1.2.1菌液制备
取一环之前分离保存的菌株分区划线接种于培养基上,37℃培养,得到单一菌落后,无菌操作接种于营养肉汤的试管中,放入摇床培养12h,4℃保存备用。
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1.2.2耐药试验
取200μl菌液于培养基中,涂布均匀,待菌液吸收后,用无菌镊子将药敏纸片贴到琼脂平板表面,均匀分布,间隔一定距离,每个平板分布7种药敏纸片,压实纸片,倒置平板,37℃培养18h后观察结果,测量抑菌圈直径,根据《抗菌药物敏感性试验执行标准解读》进行耐药性结果判定[1]。
2结果与分析
2.1多重耐药试验结果
对120株大肠杆菌进行多重耐药现象分析,结果见图1。
从图1中可看出,该鸡场多重耐药严重,耐17种药物的菌株数最多,有27株,达到20.78%,存在6株大肠杆菌耐20种药物。
2.2整体耐药试验结果
对120株大肠杆菌进行耐药性检测,结果见图2。
从图2可以看出,大环内酯类中红霉素99%耐药;四环素类中四环素99%耐药;氟喹诺酮类60%~80%耐药;氨基糖苷类中链霉素90%耐药,其余两种50%耐药;青霉素类、头孢类大部分98%以上耐药,第四代头孢50%耐药。
3讨论
本次试验耐药性较高的有红霉素、四环素、链霉素、阿莫西林、氯霉素及头孢类抗生素药物占87.6%~99.2%,其中第四代头孢耐药性较低占45.3%。氨基糖苷类的阿米卡星和大观霉素敏感性较好,敏感性基本保持在40%~50%。
4小结
红霉素、四环素、阿莫西林、第一代头孢、第二代头孢、第三代头孢、氯霉素的耐药性很高,阿米卡星的敏感性最强,多重耐药情况严重。
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